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維通達公司擁有4種主要基因修飾技術，可根據您的實驗要求，量身設計方案，采用合適的編輯方法，準確，高效的制備目標動物模型。
ES細胞是全能胚胎干細胞，該細胞可以通過胚胎嵌合，獲得ES細胞來源的小鼠。因此可以在ES上進行基因編輯，獲得基因修飾小鼠。該方法在CRISPR等技術出現之前，是主流獲得靶向基因修飾小鼠的方法。
技術一般的流程
載體構建→ 電轉ES→ 克隆鑒定→ 嵌合鼠制備→ ES小鼠獲得
圖1 經典ES打靶制備基因修飾小鼠模型流程，目前維通達可提供2種遺傳背景的小鼠ES細胞：C57BL/6，B6;129。
EPS細胞是一種全能性比普通ES更高的干細胞。相比于普通ES具有種系傳遞能力強，打靶效率高的特點。它可以有效縮短基因小鼠制備周期，降低制備費用。在制備基因敲入，條件敲除方面，效率顯著高于CRISPR法，更為重要的是不受敲入片段大小限制，是一種新型高效的基因修飾大小鼠制備策略。
圖1 EPS制備基因修飾小鼠流程圖。
技術優勢或適合應用的研究
-在制備基因敲入，條件敲除方面，效率顯著高于CRISPR/Cas9法。
-更為重要的是不受敲入片段大小限制。
-對于需要多次打靶的復雜動物模型，制備周期更短。
ES VS. EPS細胞打靶技術
EPS：維通達研究EPS技術，成功將EPS應用于基因編輯小鼠快速制備中，EPS是潛能拓展的多功能干細胞，2017年在cell上發表該項研究成果，期刊號：169(2):243-257.e25.
-ES打靶效率一般在百萬分之一的級別，與之相比，EPS基因打靶效率提高幾十倍到上百倍。
-同時EPS因為更高的全能性，具有更強的種系傳遞能力，低至1顆EPS細胞，就可一步獲得嵌合效率接近100%的ES小鼠，省去種系傳遞過程（三個月）。
-與CRISPR輔助技術相比，使用EPS細胞不再受限于敲入片段大小，周期可控，結果可預測。
EPS和ES策略流程：
CRISPR/Cas9能夠靶向基因組的特定序列，并且將DNA雙鏈打斷，引發非同源末端修復，提高同源重組修復效率?？捎糜诨蚯贸?，小片段基因敲入和基因條件敲除等基因編輯。
技術一般的流程
載體構建→設計制備gRNA→微注射→出生小鼠檢測→陽性小鼠獲得。
技術優勢或適合應用的研究
-高效率基因敲除，雙gRNA策略能夠刪除大片段DNA，從幾十bp到Mb，幾乎沒有長度限制。
-基因敲入嚴重依賴片段長度，1kb以上，敲入效率急劇下降。
-點突變等小范圍基因編輯效率高。
成功案例
圖1 雙gRNA切割，片段敲除基因方案設計。
圖2 兩個Grna切割位點之間的~550bp基因序列被高效率敲除，相對于野生帶773bp，發生敲除的鼠PCR產生~220bp的條帶。
脂質體細胞轉基因方法是常用的方法，但對于一些腫瘤細胞系，效率極低。病毒轉基因成為有效的替代方案，常用的有慢病毒，腺病毒方法.慢病毒會把外源基因整合到細胞，常用來建立轉基因細胞系、細胞熒光標記等用途。腺病毒不整合到基因組,可以用來瞬時轉染細胞。腺病毒制備較慢病毒復雜，周期長。
圖1 通過慢病毒,把luciferase轉到Raji細胞,建立穩轉細胞系。
