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SARS-CoV-2 假病
假病毒描述：
SARS-CoV-2假病毒以HIV病毒為骨架，外面包被SARS-Cov-2的 Spike 蛋白，能夠感染過表達人ACE2的細胞?？捎糜跍y試研究阻斷病毒侵入的中和抗體或其它藥物。假病毒只能單次感染，不能復制，安全性高，可在P2級實驗室使用。
假病毒參數：
產品名稱 | SARS-CoV-2 假病毒 |
貨號 | VS-SC-0001 |
熒光基團 | eGFP和Luciferase |
生物安全防護措施 | P2級實驗室 |
包裝 | 100~200ul |
感染滴度 | 2×105 TU*（基于hACE2-COS7細胞） |
拷貝數 | ＞108 |
保存 | -80℃ |
* TU（transfection unit），1TU=使1個細胞發出綠色熒光。
假病毒制備：
維通達將Spike蛋白表達質粒、包裝質粒、轉移質粒共轉染到293T細胞內，包裝出以SARS-CoV-2-Spike為表面衣殼蛋白的假病毒。假病毒同時帶有Firefly Luc和eGFP標記，可以通過有Firefly Luc和eGFP檢測感染。示意圖如下：
注意事項：
1) 病毒使用PEG8000濃縮，會有血清蛋白沉淀，外觀渾濁，但不影響使用。
2) 病毒干冰運輸，-80℃保存，使用前室溫融化。
使用方法：
1. 第一天，96孔板每孔接種5×103個hACE2-COS7細胞。
2. 第二天，除去培養板里的培養基，新鮮培養基（100ul/孔）與假病毒2×103 TU和Polybrene混合（5ug/ml終濃度），加入培養孔，培養板離心（1200g x 2 Hour，4℃）。
（2×103 TU時，luciferase的亮度約為1×106）。
3. 離心感染的細胞，吸干凈培養基，再用PBS洗一次；每孔加入30ul 0.25%的胰酶，37℃孵育5min，加入100ul完全培養基，繼續培養。
4. 感染后繼續培養3天（每天換液），進行luc檢測，也可以觀察eGFP熒光（根據情況更換培養基）。
