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基本信息
品系名稱：B6.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1 Vst /Vst
常用名： Tet-uPATg小鼠; Tet-uPA小鼠
背景：C57BL/6NCrl
毛色：黑色
鑒定方法：黑色
品系建立：
Tet-uPA小鼠是肝臟特異表達的Alb啟動子/增強子驅動的rtTA基因和TRE-uPA基因片段轉入小鼠建立的Tet-On調控的uPA轉基因小鼠，在Dox誘導下uPA在肝臟表達，可引起肝損傷（如圖1所示）。維通達建立的Tet-uPA小鼠品系是由混合背景的轉基因首建鼠與C57BL/6NCRL小鼠回交10代獲得的。Tet-uPA小鼠的優點是小鼠在未誘導時呈健康狀態，在Dox給藥誘導時才出現肝損傷，而且可以通過Dox的劑量控制肝損傷程度。
2006年，維通達研究人員構建了TRE-uPA 轉基因小鼠和Alb-rtTA轉基因小鼠，然后交配獲得了Alb-rtTA/TRE-uPA雙陽性小鼠；通過Dox誘導，在該小鼠中檢測到了uPA表達和肝損傷[1]。維通達技術人員將Alb-rtTA/TRE-uPA雙陽性小鼠連續8代回交到C57BL/6 NCrl，2018年獲得Tet-uPA B6小鼠。
模型特征
圖1 uPA基因在肝細胞的可調控表達。
繁育信息
交配方式：純合擴繁
日糧信息：SPF 繁殖鼠糧
平均產子數：6
繁育周期(周)：32
基因型鑒定信息
基因 | 引物 | 序列(5’---3’) | 產物大小 |
uPA | uPA-F | GTCGAGTAGGCGTGTACGGT | 400bp(positive) |
uPA-R | CCATTTCCATGATAGCAGGT | ||
rtTA | rtTA-F | GCTCCAGATGGCAAACATACGC | 640bp(positive) |
rtTA-R | TTCCTCCAATACGCAGCCCAGT |
表型
Tet-uPA B6小鼠，可以在任何時間用Dox誘導肝損傷。此前研究發現，小鼠肝臟特異性過表達尿激酶型纖溶酶原激活蛋白(urokinase-type plasminogen activator，uPA)可引起肝細胞壞死，即uPA轉基因小鼠可以作為肝損傷模型。但是uPA轉基因鼠的缺點是死亡率高，難于繁殖。北京維通達公司開發了可調控的更接近生理性條件的肝損傷模型Tet-uPA轉基因小鼠。這種小鼠轉入了兩個基因片段，一段是Alb-rtTA，一段是TRE-uPA，構成在肝細胞內特異表達的Tet-On系統調控的uPA轉基因結構。Tet-uPA小鼠在不誘導的情況下是完全健康狀態，可以正常繁殖；當用四環素類藥物Dox誘導時，uPA在肝細胞內表達，引起肝損傷。既可以用高劑量Dox誘導產生急性肝損傷甚至肝衰竭的表型，也可以用較低劑量持續誘導成為慢性肝損傷。在合適的時間窗口誘導uPA表達，并結合高脂飲食，Tet-uPA小鼠可以誘導成非酒精性脂肪變性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis, NASH）、肝硬化和肝癌模型。因而Tet-uPA小鼠是肝損傷機理研究、保肝藥物和NASH藥物藥效評價的理想模型。
目前業界認為最好NASH和肝癌小鼠模型是DIAMOND模型和MUP-uPA模型，而Tet-uPA比MUP-uPA小鼠更具優勢，因為MUP-uPA小鼠是在接近成體時（5、6周齡）表達uPA，窗口期有一定限制，而Tet-uPA小鼠可以在任意時期誘導uPA的表達。
B6.Tet-uPA小鼠注射Dox（100mg/kg）后血清ALT/AST
B6.Tet-uPA誘導肝損傷并HDF飼喂3個月，可以誘導類似于人的NASH模型
天狼猩紅染色 HE染色
應用領域
1.急慢性肝損傷模型等相關研究。
2.NASH模型、肝癌模型、以及藥物安全性評估等相關研究。
參考文獻
1.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.
2.Preclinical Models for Studying NASH-Driven HCC: How Useful Are They?Cell Metabolism 29, January 8, 2019
